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Sélection du solvant de phase mobile :
Le choix correct du solvant de phase mobile est très important pour le succès de la chromatographie liquide à haute performance (CLHP). À l’heure actuelle, il n’existe pas de mode de sélection idéal, qui dépend principalement de l’accumulation d’expérience.
Les exigences générales pour la sélection des solvants en phase mobile sont les suivantes :
(1) Le solvant doit être de haute pureté, le solvant et la phase stationnaire ne sont pas solubles mutuellement et peuvent maintenir la stabilité de la colonne;
(2) Les performances du solvant et du détecteur utilisé doivent correspondre;
(3) Le solvant de l’échantillon doit avoir une solubilité suffisante;
4° le solvant doit avoir une faible viscosité et un point d’ébullition bas approprié;
(5) Essayer d’éviter l’utilisation de solvants présentant une toxicité importante.
Lors de la sélection du solvant de phase mobile, l’efficacité de la colonne, le facteur de séparation A et le facteur de capacité peuvent être pris en compte. La sélection du solvant doit d’abord exclure certaines propriétés physiques (telles que le point d’ébullition, la viscosité, l’absorption UV, etc.) ne conviennent pas à une utilisation en chromatographie liquide, puis sélectionner le solvant qui peut maintenir la valeur du facteur volumique des composants dans l’échantillon d’analyse entre 1 ~ 1O, la force d’élution est appropriée. Pour les échantillons multi-composants, la valeur peut être étendue entre 0,5 et 20. Parmi les solvants permettant de sélectionner des valeurs appropriées, il convient de sélectionner d’autres solvants capables de séparer les différents groupes de l’échantillon et de permettre de sélectionner le facteur de séparation A de chaque composant adjacent supérieur à 1,05. Le solvant choisi pour Ic et A doit également être combiné avec une colonne qui fournit un numéro de plaque théorique élevé.
Par conséquent, en tant que chromatographe, il est très important de connaître les paramètres importants des propriétés physiques et chimiques des solvants, tels que le paramètre de résistance du solvant, le paramètre de solubilité δ, le paramètre de polarité P, la viscosité η, etc., pour la sélection de solvants de phase mobile en chromatographie liquide.
Plus de 100 solvants peuvent être utilisés comme phase mobile de chromatographie liquide, mais seulement quelques solvants pratiques. En laboratoire avec du méthanol, de l’acétonitrile, de l’eau, du tétrahydrofurane, de l’hexane, du dichlorométhane, peut résoudre le problème de séparation chromatographique de plus de 9O %.
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